安捷伦色谱柱要怎么用才是正确的?
浏览次数:1480发布日期:2020-08-24
安捷伦色谱柱是亲水相互作用色谱柱,它的保留模式类似于正相,并且突破了正相模式的溶剂限制,使用反相系统,并且峰在正相序列中。通过亲水相互作用,可以有效地从反相色谱柱中分离出由于保留能力弱而难以分离的强极性化合物。这是一种分离机制,并且该分离机制有很多键合相,固定相为极性,流动相中的水相为强洗脱液,这与传统的反相色谱法*相反。
1、获得色谱柱后,请先阅读手册,以了解色谱柱的具体性能:温度耐受性,pH耐受性等,以及色谱柱的洗涤和储存条件。经过色谱柱校准测试后,在确认色谱柱本身没有问题后,色谱柱即可正常使用。
2、样品应进行充分预处理,以确保样品清洁;应使用保护柱或在线过滤器,并应根据实际情况更换保护柱芯或过滤器件。
3、安捷伦色谱柱避免了压力和温度的剧烈变化以及任何机械振动。
4、溶剂的组成应逐渐变化,尤其是在反相色谱中在流动相中使用缓冲盐时,避免盐析。
5、应选择合适的流动相,以避免破坏固定相,避免pH值低,共价键断裂,键和相水解以及pH值过高,硅胶溶解。
6、在使用色谱柱的过程中,如果压力升高或发生污染,请选择适当的冲洗或反冲洗条件。
同时,安捷伦色谱柱与阴离子和阳离子的静电相互作用弱,对目标的选择性不同;提供氢键,分子和静电吸引的多种作用;可以为强极性目标提供适当的保留;使用水溶性有机相作为流动相可以显着提高样品在流动相中的溶解度,分离极性和亲水性小分子靶标和基本药物分子。