如何才能用好安捷伦色谱柱这件事确实值得好好学习

　　安捷伦色谱柱的正确使用和维护非常重要，稍有不慎就会降低色谱柱效率，缩短使用寿命，甚至损坏色谱柱。在色谱操作过程中，为了维护色谱柱，需要注意以下几个问题。

　　

　　1、避免压力和温度的急剧变化以及任何机械振动。温度的突然变化或色谱柱从高处坠落都会影响柱内的填充情况；柱压的突然升高或降低也会对柱内的填料产生冲击，因此应缓慢调节流速，进样时阀门转动不宜过慢。

　　

　　2、溶剂的组成应逐渐改变，尤其是反相色谱。不应直接由有机溶剂改为全水，反之亦然。

　　

　　3、一般来说，色谱柱不能反冲。只有在生产厂家表明可以反冲的情况下，才能通过反冲去除残留在柱头的杂质。否则，反冲会迅速降低柱效。

　　

　　4、选择使用合适的流动相（尤其是pH），避免破坏固定相。有时可以在进样器前面连接一个预柱。分析柱为键合硅胶时，前置柱为硅胶，可以使流动相在进入分析柱前被硅胶“饱和”，避免硅胶基质在分析柱中溶解。
 

　　

　　5、避免将基质复杂的样品，尤其是生物样品直接注入色谱柱。需要对样品进行预处理或在进样器和色谱柱之间连接保护柱。保护柱通常是填充有类似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。

　　

　　6、经常用强溶剂清洗色谱柱，以除去柱内残留的杂质。清洗时，对流路径系统中流动相的更换应逐渐用可混溶的溶剂转移，每个流动相的体积应为柱体积的20倍左右，即常规分析需要50~75ml。

　　

　　7、色谱柱存放时，用乙腈或甲醇填充色谱柱，并拧紧色谱柱接头，防止溶剂挥发干燥。不要将缓冲溶液留在柱子中过夜或更长时间。

　　

　　8、色谱柱在使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结过滤器堵塞。此时应更换或拆下过滤器进行清洗；另一种可能是大分子进入柱子，污染柱头；如果柱效降低或色谱峰变形，柱头可能会塌陷，死体积可能会增加。

　　

　　一般安捷伦色谱柱在正确使用的情况下，使用寿命可达2年以上。硅胶基填料只能在ph2~9范围内使用。柱子使用一段时间后，一些吸附力强的物质可能会残留在柱子顶部，尤其是一些有色物质更容易被看到吸附在柱子顶部的填料上。新色谱柱使用一段时间后，柱顶填料可能会塌陷，降低柱效。这时也可以加入填料来恢复柱效。

　　

　　安捷伦色谱柱每次工作后，最好用洗脱能力强的洗脱液清洗。例如，ODS柱应用甲醇清洗至基线平衡。当使用盐缓冲溶液作为流动相时，应在使用后用无盐流动相清洗。含有卤素（氟、氯、溴）的化合物可能会腐蚀不锈钢管道，不应长时间接触。如果安装在HPLC仪器上的色谱柱不经常使用，应每4-5天打开并清洗15分钟。