5064-8267安捷伦ZORBAX 300SB-C18色谱柱

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5064-8267 ZORBAX 300SB-C18，3.5µm, 0.3 x 150 mm

应用一种新的毛细管 HPLC-ICP-MS 接口进
行富硒酵母中含硒蛋白的鉴定
饮食是人体硒 (Se) 的主要来源， 该必需元素的摄入主要取决于食品中的硒含量
和所消耗的食物量。 由于许多国家农产品中硒的含量很低， 所以硒缺乏成为了一
个值得注意的问题。 人们已经开发了许多提高人体硒摄入的食品添加策略； 富硒
酵母就是人和动物添加剂最常用的硒来源之一。
评估硒是否充分不仅需要了解硒总含量， 而且还要了解各种形态硒的含量。 但
到目前为止， 大部分研究都仅限于针对占总硒 12-20% 左右的水溶性酵母成分。
酵母的不溶性硒组分很多尚未被发现， 表征这类主要组分的工作非常少， 其中
Chassaigne 和 Chéry [1] 曾研究过酵母蛋白的硒特异性激光消融 (LA-) ICP-MS指纹谱， Tastet 等人 [2] 曾用实验室自制的 nanoHPLCICP-MS 接口对富硒多肽进行了硒选择性检测。 在常规方法
中， 通过测定总硒代蛋氨酸含量（ 含硒蛋白含量） 来评估
富硒酵母的质量。
本研究提出了一个 ICP-MS 辅助的蛋白质组学方法， 用于
鉴定富硒酵母中的含硒蛋白。 采用双向凝胶电泳分离不溶
性含硒蛋白。 使用 LA-ICP-MS 找出分离后的含硒蛋白斑
点， 经切割后， 用胰蛋白酶消化； 所得多肽通过毛细管
HPLC-ICP-MS 进行分析， 然后用电喷雾离子化 (ESI-) MS/MS
进行表征， 鉴定出富硒酵母中主要的含硒蛋白——甘油
醛-3-磷酸酯脱氢酶-3。 由于胰蛋白酶裂解产物量非常少，
所以需要使用毛细管色谱

5064-8267安捷伦ZORBAX 300SB-C18色谱柱

文建立了有效的 ICP-MS 辅助蛋白质组学方法， 用于鉴
定市售富硒酵母样品不溶性硒组分中的含硒蛋白。 采用双
向凝胶电泳分离含硒蛋白， 并用胰蛋白酶进行裂解。 采用
LA-ICP-MS、 毛细管 HPLC-ICP-MS 和 ESI MS/MS 组合
方法对裂解产物进行鉴定、 分析和表征。 由于胰酶裂解产
物量非常少， 所以需要使用毛细管色谱。 采用本方法鉴定
出了甘油醛-3-磷酸酯脱氢酶-3， 这是富硒酵母中的主要含
硒蛋白。 证明由于蛋白链中的硫-硒取代途径而引入硒， 存
在于蛋氨酸 (M) 和半胱氨酸 (C) 残基中， 后者在酵母样品
中首次发现