安捷伦液相色谱仪1100可编程荧光检测器维修

安捷伦液相色谱仪1100可编程荧光检测器维修

HPLC故障排除  症状类型 可能的原因  解决方案  基线噪声大
随机性-污染物积聚
冲洗柱;净化样品;使用HPLC级溶剂
连续性-检测器灯故障
更换紫外灯(寿命为1000小时)
偶然性-外部电气干扰
使用LC系统专用稳压器
样品量过大
进样量应为流动相进样量的1/6
双峰
样品量过大
进样量应为流动相进样量的1/6
进样溶剂过强
使用较弱的进样溶剂或流动相
滤芯堵塞
更换并使用0.5μm孔隙率的在线过滤器
柱有空隙或气沟
用玻璃珠或填料填充空隙;重填柱
进样器流路不通畅
更换进样器转子
柱头有空隙
使用填料或玻璃珠填充柱顶部
柱上样品超载
使用更高负载量的固定相;增加色谱柱内径;减少样品量
单峰-存在干扰性组分
净化样品;预分离
拖尾峰
开始出双峰
请参见双峰
存在未扫的死体积
减少接头的数量;确保进样器密封垫紧密;确保接头正确固定
碱性化合物-硅醇相互作用
换成聚合物固定相
碱性物质-硅醇相互作用
使用更强的流动相或添加竞争碱(例如,)
硅胶基-柱降解
使用特种色谱柱;聚合物柱或空间位阻
峰展宽
进样量过大
降低进样溶剂的强度以集中溶质
进样阀中的峰扩散
在进样前/后引入气泡以减少扩散
数据系统的采样速率过低
增大采样
检测器时间常数低
调节时间常数使之与峰宽匹配
流动相粘度过高
提高柱温
检测器流通池容积过大
使用尽可能小的池容积(系统中无热交换器)
注射器体积过大
减少进样量
保留时间长
使用梯度洗脱或较强的流动相
压力波动
单向阀泄漏
更换单向阀
泵密封垫泄漏
更换泵密封垫
微粒积聚
过滤样品；在线过滤器;过滤流动相
压力渐增
微粒积聚
过滤样品；在线过滤器;过滤流动相
水/有机系统-缓冲液沉淀
测试缓冲液-有机混合物;确保兼容性
保留时间超出总渗透体积
体积排阻-特异性相互作用
添加流动相改性剂或更改溶剂
保留时间不断变动
柱温不断变化
使柱恒温;绝缘;保证实验室温度恒定
平衡时间不足以适应梯度洗脱要求,或梯度洗脱流动相起变化
确信在溶剂改变或梯度结束后至少10个柱容积通过色谱柱
流动相组分选择性蒸发
减少氦气的剧烈脱气;保持溶剂贮器盖好;制备新的流动相
缓冲能力不足
用>20mM浓度的缓冲液
在线流动相混合不一致
保证梯度系统输送恒定组成;与手动制备流动相核对
污染积聚
冲洗色谱柱以去除污染物
最初几次进样-吸附在活性部位
用浓样品进样冲洗柱,使其处于正常状态
保留时间逐渐缩短
流速在增加
检查泵以确保正确;否则需重调
柱上进样超载
减少样品
键合固定相的流失
保持流动相pH值在2-8.5间
保留时间逐渐增加
流速在减慢
解决液流中的漏液现象,更换泵密封垫,检查泵的涡流和气泡
硅胶填料的活化点
使用流动相改性剂
键合固定相的流失
保持流动相pH值在2-8.5间
流动相组成在变化
确保流动相容器盖好
硅胶填料的活化点
流动相中加竞争碱
硅胶填料的活化点
固定相用更高覆盖度的填充料
灵敏度问题
峰位于检测器线性范围之外
稀释或浓缩使之处于线性区内
最初几次进样-样品在样品池或柱中被吸附;自动进样器;流路阻塞
用浓样品处理样品池/柱
自动进样器流路阻塞
检查流量情况,确保无阻塞现象
进样器样品定量管未充满
确保样品池中已充满样品
在样品制品时有关的样品流失
用内标法在制备样品,优化样品制备方法
柱平衡时间减慢（离子对现象）
长链离子对试剂平衡时间慢
使用较短的烷链试剂

安捷伦液相色谱仪1100可编程荧光检测器维修